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病毒采样管在新冠肺炎席卷全球时被人们所熟知,熟不知早在我们的日常检验和防治中就常规使用, 在防治畜禽疾病中,很多畜禽传染病的临床症状不明显,单凭临床经验是难以做到确切诊断、准确用药,往往因此而贻误了病情。为此,需要通过从病畜或尸体用病毒采样管采取病料,进一步做微生物学和血清学化验,查清病原,进而有针对性地采取相应的防治措施,以达到预防、控制和扑灭传染病的目的,同时减少临床工作的盲目性,提高兽医人员的技术水平,保护养殖户的利益。而病料采集、保存、送检的方法是否正确,直接影响到检验的结果和防治工作的开展,故采集检测样品是诊断检测工作的重要内容,另外采样的时机是否适宜,样品是否具有代表性,样品处理、保存、运送是否及时等,都会影响到检验结果的准确性和可靠性。
下面就如何正确地采集、保存、送检病料等进行归纳和整理,希望能够对基层兽医和养殖户提供一些借鉴。
一、采集原则
1,新鲜、具代表性,且足量:采集死禽样本,夏天6小时之内完成,冬天在24小时之内完成:采集样品的数量要满足诊断检测的需要,并留有余地,以备必要时复检使用。
2,减少对病料的污染:在做尸体剖检时,应将尸体浸泡在消毒剂溶液中,防止羽毛及皮屑飞扬对病料造成的污染;病料采集时,对采集病料的器械及容器必须提前消毒,减少因器械或盛放病料的容器对病料的污染:尸体剖开腹腔时,一时间采样管采取病料,减少病料因暴露于空气中而造成的污染。
3,典型采样:选取未经药物治疗、症状最典型或病变最明显的样品,如有并发症,还应兼顾采样。
4,合理采样:根据诊断检测的要求,须严格按照规定采集各种足够数量的样品外,不同疫病的需检样品各异,应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何种疫病的,应全面采样。
5,安全采样:既要保护采样人员,以要防止病原外泄,还要防止样品受到污染。
6,迅速送检:应尽快送实验室进行检测,延误送检时间,会影响到检测质量和结果的可靠性。
二、病料的采集方法
1,组织和实质器官的采集:剖开腹腔后,必须注意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养,要以烧红的手术刀片烫烙脏器表面,使用经火焰灭菌的接种针插入烫烙的部位,提取少量的组织或液体,作涂片镜检或接种于培养基上,进行培养。
2,液体病料的采集:采集血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料,使用灭菌吸管或注射器,经烫烙部位吸取病变组织的液体,将病料注入灭菌的试管中塞好棉塞送检。
3,全血的采集方法:用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2-5毫升,注入灭菌试管中。建议加入少量的抗凝剂(3.8%拘摊酸钠0.1一0.5毫升或柠檬酸钠液,配制方法:葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g.氯化钠0.42g,加蒸馏水至100mI高压灭菌10磅八0分钟。)
4,血清的采集方法:用灭菌注射器自禽的心脏或翅静脉采血2毫升,注入灭菌的1.5m1离心管中摆成斜面,待血液凝固血清析出后,将血清吸出注入另一个灭菌试管中,备用。
5,肠道及肠内容物的采集方法:选择病变明显部位的肠道,将内容物弃掉,用灭菌生理盐水冲洗干净,然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。亦可将肠管切开,用灭菌生理盐水冲洗干净,然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面,将接种针插入粘膜层,取少量病料接种于培养基上。采集肠内容物则需用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层,将接种针插入肠道内,吸取少量肠内容,放入试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧,去掉其它部分送检。
6,皮肤及羽毛的采集:皮肤要选病变明显部分的边缘,采取少许放入灭菌的病毒采样管中送检;羽毛也要选病变明显部分,用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑少许,放入灭菌的试管中送检:采集孵化室的绒毛需用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克,放入灭菌的试管中送检。
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