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肝素是用于血液化学成分检测的优选抗凝剂。肝素与抗凝血酶III结合引起抗凝血酶III构型发生变化,加速凝血酶一凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外肝素还能借助血浆辅助因天(肝素辅助因矛II)来抑制凝血酶。
常用采血管肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、 鞍盐,其中以肝素锂更好,但其价格较贵,钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量,铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为10.0~12.5IU/ml肝素对血液成分干扰较少,不影响红细胞体积,不引起溶血,适用于做细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压红积及普通生化测定。肝素具有抗凝血酶作用,不适合做血凝试验。另外,肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少,所以不适合做白细胞分类和血小板计数,更不能用于止血检验。此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因为Wright染色后出现深蓝色背景影响显微镜减产。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久久血液又可凝固。
乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)
ED丁A能与血液中Ca2+结合成螯合物,凝血过程被阻断,血液不能发生凝固。ED丁A盐有钾、钠、锂盐,国际血液学标准化委员会推荐使用的是ED丁A-K2,其溶解度其高,抗凝速度更快。 EDTA盐通常每ml血液加1 .5mgEDTA.EDTA盐不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响较小,抑制血小板的聚集,适用一般血液学检测。如果采血管的抗凝剂浓度过高,渗透压上升,会造成细胞皱缩。
EDTA溶液pH与盐类关系较大,低pH可使细胞膨胀。EDTA- K2可使红细胞体积轻度膨胀,采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于稳定。ED丁A-K2使Ca2+, Mg2+下降,同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶降低,EDTA-K2的较佳浓度大1.5mg/ml血液,如果血少,中性粒细胞会肿胀分叶消失,血小板会肿胀、崩解,产生正常血小板的碎片,使分析结果产生错误。EDTA盐能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合,不适于血凝和血小板功能检测,也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外,EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子,故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。 枸橼酸盐主要是构椽酸钠,其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断,从而阻止血液凝固。构椽酸钠有Na3C6H5O7·2H20和2Na3C6H507.11H20两种晶体,通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液,与血液按照1:9体积混合。大部分凝血试验都可用构椽酸钠抗凝,它有助于V因子和VⅢ因子的稳定,并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小,可用于血小板功能分析。构椽酸钠细胞毒性较小,也是输血中血液保养液的成分之一。但是,构椽酸钠6mg才能抗凝1ml血液,碱性强,不适用于血液分析和生化测验。
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